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　　一、项目基本情况项目编号项目名称：浙江大学超重力单向振动台预算金额：5611.000000 万元（人民币）最高限价（如有）：5611.000000 万元（人民币）采购需求：序号项目名称数量单位预算金额（万元）最高限价（万元）是否允许采购进口产品简要技术描述或基本概况介绍1超重力单向振动台1套56115611否详见《第三章招标需求》。 合同履行期限：详见《第三章 招标需求》本项目( 不接受 )联合体投标。二、获取招标文件时间：2026年03月16日 至 2026年03月26日，每天上午9:00至12:00，下午13:30至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：杭州市凤起路334号同方财富大厦14楼1409室方式：邮件报名获取【邮件报名时请将（1）招标（采购）文件获取登记表（Word版）和（2）招标文件费用凭证发送至】。售价：￥500.0 元，本公告包含的招标文件售价总和三、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名 称：浙江大学地址：杭州市西湖区余杭塘路866号联系方式：纪老师； 采购部门邮箱：.采购代理机构信息名 称：浙江省国际技术设备招标有限公司地址：杭州市凤起路334号同方财富大厦14层联系方式：赵佳璐、杨慧、汪江洪、85860557、858602423.项目联系方式项目联系人：赵佳璐、杨慧、汪江洪电线

　　关键词：北京基尔比生物微重力培养系统；细胞外囊泡;免疫调节;微重力模拟;Rab27B;组织修复与再生。一、研究背景与科学问题1.1 研究背景间充质干细胞（MSCs）来源的细胞外囊泡（EVs）因其免疫调节和组织再生功能，已成为无细胞治疗的重要候选。然而，传统二维（2D）培养体系存在产量低、细胞易衰老、EVs功能受限等瓶颈，严重制约临床转化。微重力环境作为一种创新的三维（3D）动态培养策略，可通过平衡重力与流体剪切力，维持细胞悬浮状态，促进细胞形成类组织微聚集体，同时保持干细胞特性。已有研究表明，模拟微重力可显著提升MSCs的增殖能力和干性维持，但其对EVs产量及功能的影响机制尚不完全明确。1.2 科学问题核心问题：地面模拟微重力培养系统能否优化人脐带间充质干细胞（hucMSCs）的EVs生产效率及生物学功能？机制问题：微重力环境下EVs分泌增强的分子机制是什么？Rab27B等关键分子是否发挥调控作用？二、研究目标目标层级具体目标总体目标建立基于微重力培养的hucMSC-EVs规模化生产工艺，阐明微重力调控EVs分泌与功能的分子机制目标1验证微重力培养对hucMSCs增殖、干性维持及EVs产量的提升效应目标2系统评价微重力来源EVs（μg-EVs）的蛋白质组学特征及功能优势目标3揭示Rab27B介导的微重力EVs分泌调控机制，并通过基因干预验证其必要性目标4在牙周炎动物模型中验证μg-EVs的治疗潜力三、技术路线第一阶段：地面模拟微重力培养条件优化与细胞特性评价第二阶段：EVs分离鉴定与产量分析第三阶段：蛋白质组学与功能评价第四阶段：Rab27B机制研究与基因干预验证第五阶段：体内治疗效果验证四、研究内容与方法4.1 实验材料类别具体内容细胞来源人脐带间充质干细胞（hucMSCs，P3-P6代）人牙周膜干细胞（PDLSCs）小鼠RAW264.7巨噬细胞系核心设备Kilby Gravity微重力培养系统（北京基尔比生物科技有限公司）对照设置传统2D静态培养（T-25培养瓶，含10%无外泌体FBS的α-MEM）4.2 Kilby Gravity地面微重力模拟系统操作参数4.3 EVs分离与表征流程分离流程（差速超速离心法）：收集培养上清，300×g，10min，4°C → 去除残留细胞3,000×g，10min，4°C → 去除死细胞10,000×g，30min，4°C → 去除凋亡小体及细胞碎片120,000×g，70min，4°C，×2次 → 获取EVs沉淀PBS重悬，-80°C保存表征指标：形态学：透射电镜（TEM，负染色）粒径分布：纳米颗粒追踪分析（NTA，NanoSight NS300）表面标志：Western blot（CD9、CD63、CD81阳性；Calnexin阴性）表面电荷：Zeta电位测定4.4 关键实验设计实验1：EVs产量对比（n=6独立实验）检测指标2D-g-EVs微重力-μg-EVs预期结果总颗粒浓度（particles/mL）基线倍μg-EVs显著增加平均粒径（nm）~163~175μg-EVs略大，载药能力增强单细胞产量（particles/cell）基线倍单细胞分泌能力增强CD63表达（IF荧光强度）基线显著上调MVBs形成增加实验2：蛋白质组学分析样本：g-EVs vs μg-EVs（每组3个生物学重复）技术：Label-free LC-MS/MS（Q Exactive HF-X）分析内容：差异表达蛋白筛选（log2FC≥1，pGO功能富集（免疫调节、组织修复、血管生成相关通路）韦恩图分析特有/共有蛋白实验3：体外功能评价巨噬细胞极化实验：LPS（100 ng/mL）诱导RAW264.7细胞M1极化EVs处理（20 μg/mL蛋白质等量），24小时检测指标：qPCR：Nos2、CD86（M1标志）；Arg1、CD206（M2标志）流式细胞术：iNOS⁺、CD86⁺、Arg1⁺、CD206⁺细胞比例PDLSCs成骨分化：成骨诱导培养基+EVs（20 μg/mL）时间点：7天（ALP染色）、21天（ARS染色）检测指标：ALP活性、矿化结节面积、成骨基因（RUNX2、OSX、ALP）表达实验4：Rab27B机制研究基因干预策略：步骤操作内容靶点筛选细胞蛋白质组学筛选EVs生物发生相关蛋白（Rab家族、ESCRT组件等）表达验证WB、免疫荧光验证Rab27B在μg-cells中的上调敲低构建慢病毒载体携带Rab27B-shRNA（序列：5-GCAGATCATCAAAGACAA-3）对照组：Scramble shRNA功能验证比较μg-EVs vs sh-μgEVs的产量、巨噬细胞极化、成骨诱导能力实验5：体内牙周炎治疗动物模型：C57BL/6小鼠，6-8周龄，雄性造模：双侧上颌第二磨牙丝线/组）：健康对照组（Control）牙周炎组（PD）PD + g-EVs（50 μg/位点，每2天1次，局部牙龈注射）PD + μg-EVs（50 μg/位点）PD + sh-μgEVs（50 μg/位点）评价终点：Micro-CT三维重建：BV/TV、CEJ-ABC距离组织学：H&E染色（附着丧失、炎症评分）免疫组化：ALP表达（成骨活性）免疫荧光：F4/80⁺iNOS⁺（M1）vs F4/80⁺CD206⁺（M2）巨噬细胞比例安全性：主要脏器HE染色五、预期结果与创新点5.1 预期结果研究内容预期发现产量优化地面微重力模拟系统使EVs总产量提升7-8倍，单细胞产量提升3-4倍功能增强μg-EVs更有效地诱导M2巨噬细胞极化（Arg1/CD206↑↑）和促进PDLSCs成骨分化机制阐明Rab27B在微重力环境下显著上调，敲低后EVs产量和功能均下降，证实其为关键调控分子治疗验证μg-EVs显著减少牙周炎小鼠骨吸收，效果优于g-EVs，且Rab27B敲低后疗效减弱5.2 创新点技术平台创新：首次地面模拟微重力培养在干细胞EVs生产中的应用效能，建立标准化工艺参数机制深度解析：阐明Rab27B介导的微重力EVs分泌调控新机制，为EVs生物工程提供分子靶点功能验证完整：从体外（巨噬细胞-成骨细胞互作）到体内（炎症性骨丢失模型）多层次验证μg-EVs的治疗优势临床转化价值：为解决EVs规模化生产瓶颈提供可行方案，推动无细胞治疗临床转化六、研究计划与预算6.1 时间安排（18个月）6.2 关键设备与试剂项目规格/数量用途Kilby Gravity微重力培养系统1套核心培养平台超速离心机1台（≥120,000×g）EVs分离NanoSight NS300共享平台NTA粒径分析LC-MS/MS服务2组（细胞+EVs）蛋白质组学Rab27B-shRNA慢病毒定制基因干预实验动物C57BL/6小鼠30只体内验证七、可行性分析技术成熟：差速超速离心、NTA、蛋白质组学等技术均为实验室常规技术，操作成熟平台支持：北京基尔比生物研制的Kilby Gravity微重力培养系统，技术支持便捷，成本可控前期工作基础：hucMSCs分离培养体系已建立，PDLSCs成骨分化模型成熟团队能力：具备干细胞培养、EVs研究、动物实验等完整技术链条八、预期成果学术论文：高水平SCI论文1-2篇（目标期刊：Stem Cell Research & Therapy, Journal of Extracellular Vesicles等）专利申请：微重力EVs生产工艺、Rab27B作为EVs质量标志物的应用技术转化：建立基于Kilby Gravity地面微重力模拟系统的EVs规模化生产标准流程临床前数据：为牙周炎等炎症性骨病的EVs治疗提供临床前证据附：北 京 基 尔 比 生物科技公司主营产品：Kilby 多通道3D细胞培养系统，Kilby Gravity 微重力旋转细胞培养系统RCCS，动植物/微生物等地面重力环境模拟装置【可以定制】，Kilby Bio类器官精密自重力摇床，Kirkstall Quasi Vivo 类器官3D串联芯片灌流培养系统请联系我们，了解更多产品详情！

　　一、项目基本情况项目编号：QSZB-Z(H)-A25084(GK)项目名称：超重力三向振动台预算金额：3500.000000 万元（人民币）最高限价（如有）：3500.000000 万元（人民币）采购需求：序号名称数量单位简要技术需求或服务要求是否允许采购进口产品预算金额（万元）最高限价（万元）一超重力三向振动台1套详见采购需求否35003500合同履行期限：合同签订后13个月内在需方指定地点进行验收本项目( 不接受 )联合体投标。二、获取招标文件时间：2025年04月29日 至 2025年05月09日，每天上午8:30至11:30，下午13:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：微信获取（扫描附件二维码或关注“浙江求是招标代理有限公司”企业公众号）或现场获取。地点：浙江求是招标代理有限公司（杭州市西湖区玉古路173号中田大厦21楼H室）方式：微信获取（扫描附件二维码或关注“浙江求是招标代理有限公司”企业公众号）或现场获取。 获取文件联系人：於路莹；联系方式售价：￥0.0 元，本公告包含的招标文件售价总和三、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名 称：浙江大学地址：杭州市西湖区余杭塘路886号联系方式：纪老师，，采购部门邮箱：.cn2.采购代理机构信息名 称：浙江求是招标代理有限公司地址：杭州市西湖区玉古路173号中田大厦21楼联系方式：陈宵、刘工，3.项目联系方式项目联系人：陈宵、刘工电线